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導(dǎo)致色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的常見原因及解決方法

2025-2-25 10:49:19      點擊:

在使用高效液相色譜系統(tǒng)進行日常分析檢測的過程中,有時會遇到色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的問題,導(dǎo)致無法對組分進行準(zhǔn)確定量。

  出峰面積重現(xiàn)性差的話,首先要看保留時間是否穩(wěn)定。如果保留時間都不穩(wěn)定,那也不用說出峰面積的穩(wěn)定了。而保留時間的穩(wěn)定性,跟 系統(tǒng)的壓力、流動相比例、流動相的脫氣以及 色譜柱都有關(guān)系。

  導(dǎo)致色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的常見原因及解決方法:

  1、檢查進樣量及進樣操作

  進樣量不符合要求或者進樣時操作失誤,都可能導(dǎo)致色譜峰面積重現(xiàn)性差。

  如果是使用手動進樣器且方法要求進樣量小于定量環(huán)體積,必須使用合格的小體積進樣針完成進樣,且盡可能控制每次進樣體積一樣。

  如果是使用自動進樣器,需檢查進樣系統(tǒng)是否存在氣泡、樣品瓶是否裝得過滿、是否存在進樣針座堵塞或漏液等。

  2、查看峰型

  如果峰型差,比如拖尾或者前沿、峰頂出現(xiàn)分叉等,將會影響工作站積分重復(fù)性。

  3、核查樣品濃度

  樣品尤其是揮發(fā)性樣品,可能由于放置時間過長而引起樣品濃度變化,導(dǎo)致峰面積重現(xiàn)性差。

  4、核查樣品穩(wěn)定性

  有的化合物可能室溫下不穩(wěn)定,再新配溶液進樣試試看。

  5、查看保留時間

  保留時間不穩(wěn)定對峰面積重復(fù)性有很大的影響(一般保留時間越長峰面積會越小),因此所有可能影響保留時間重現(xiàn)性的原因都有可能導(dǎo)致峰面積重現(xiàn)性差。在此之前我們已詳細(xì)分析過這些因素,主要包括:流動相流速不穩(wěn)定、流動相組成變化、色譜柱老化、柱溫變化等。

  6、檢查流動相

  樣品與流動相起始比例不兼容,有的樣品組分在梯度起始流動相里可能析出,請調(diào)整合適的流動相。

  7、檢查色譜柱

  色譜柱污染了,請使用更強的洗脫溶劑沖洗色譜柱。

  8、核查檢測器參數(shù)

  應(yīng)核查檢測器的各項參數(shù):比如UV檢測器的溫度(若設(shè)置溫度)是否穩(wěn)定,CAD檢測器的載氣流速、氣體壓力是否正常等。

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